เก็บพลาสมิดที่ย่อยไว้ได้ไหม

สารบัญ:

เก็บพลาสมิดที่ย่อยไว้ได้ไหม
เก็บพลาสมิดที่ย่อยไว้ได้ไหม
Anonim

ผลิตภัณฑ์ของการย่อยแบบจำกัดสามารถจัดเก็บได้ง่าย ที่ -20 C. ที่อุณหภูมิ 4 C คงจะดี แต่เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีกิจกรรมและไม่มีการติดดาว แนะนำให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 C.

คุณเก็บ DNA ที่ย่อยอย่างไร

ลอง เก็บชิ้นเจลไว้ในตู้เย็นข้ามคืน หรือแม้กระทั่งละลายชิ้นในบัฟเฟอร์แล้วแช่แข็งที่ -20 °C หรือ -80 °C การเสื่อมสภาพของ DNA จะเกิดขึ้นในอัตราเดียวกันและภายใต้สภาวะเดียวกันกับ DNA ที่ละลายได้ ดังนั้นควรใช้อุณหภูมิที่เย็นกว่าเพื่อการเก็บรักษาที่ยาวนานขึ้น

การย่อยพลาสมิดหมายความว่าอย่างไร

พลาสมิด DNA ที่บริสุทธิ์จะถูกย่อยด้วย เอ็นไซม์จำกัด (REs) ตั้งแต่ 1 ตัวขึ้นไป ที่ถูกเลือกเพื่อให้มีรูปแบบแถบ DNA ที่ชัดเจน ซึ่งแก้ไขได้ง่ายด้วยอิเล็กโตรโฟรีซิส … โดยปกติแล้ว เอ็นไซม์จำกัดที่ตัดภายในไซต์การโคลนหลายจุด (MCS) และส่งผลให้มีรูปแบบการวินิจฉัย 2-5 แถบที่ง่ายต่อการแก้ไขมักจะถูกเลือก

คุณเก็บพลาสมิดเชิงเส้นอย่างไร

หากคุณกังวลเกี่ยวกับผลกระทบของ TE ที่ปลายน้ำ ให้เก็บ DNA ไว้ที่ a ความเข้มข้นที่สูงขึ้นและเจือจางเมื่อจำเป็น หรือใช้ "low TE" ซึ่งก็คือ 10 mM Tris / EDTA 0.1 มิลลิโมลาร์ เมื่อ DNA หรือ RNA สะอาด สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20C ได้นานหลายเดือนโดยไม่ลดทอนคุณภาพใดๆ

คุณสามารถแยกแยะข้อ จำกัด ได้นานแค่ไหน

Pro-Tip ขึ้นอยู่กับการใช้งานและปริมาณของ DNA ในปฏิกิริยา ระยะฟักตัวสามารถอยู่ในช่วงตั้งแต่ 45 นาทีถึงข้ามคืนสำหรับการสรุปการวินิจฉัย 1-2 ชั่วโมงก็เพียงพอแล้วสำหรับการย่อยที่มี DNA >1 µg ที่ใช้ในการโคลน ขอแนะนำให้ย่อยอย่างน้อย 4 ชั่วโมง

บทความที่น่าสนใจ
จมูกข้าวสาลีที่มีความเสถียรคืออะไร?
อ่านเพิ่มเติม
คำถามยอดนิยม

จมูกข้าวสาลีที่มีความเสถียรคืออะไร?

ความแตกต่างระหว่างทั้งสองคือจมูกข้าวสาลีที่มีความเสถียรมี ได้รับความร้อนเพื่อให้แน่ใจว่าจะไม่เกิดออกซิไดซ์และกลายเป็นหืน แต่ยังคงรสชาติและคุณภาพทางโภชนาการไว้ ต้นข้าวสาลีมีความเสถียรอย่างไร เมื่อเมล็ดธัญพืชผ่านการขัดสีแล้ว รำและจมูกข้าวจะถูกลบออก เหลือแต่เอนโดสเปิร์มคาร์โบไฮเดรตสูงที่เป็นแป้ง … ทำให้จมูกข้าวสาลีมีเสถียรภาพ เพิ่งถูกนึ่งเพื่อทำให้เสถียร จึงไม่เกิดออกซิไดซ์และกลายเป็นหืน แต่ยังคงรสชาติและคุณภาพทางโภชนาการเอาไว้ ทำไมจมูกข้าวสาลีถึงไม่ดีสำหรับคุณ น้ำ

ใน myasthenia gravis ได้รับผลกระทบ?
อ่านเพิ่มเติม
คำถามยอดนิยม

ใน myasthenia gravis ได้รับผลกระทบ?

Myasthenia gravis ส่งผลกระทบต่อ กล้ามเนื้อโดยสมัครใจของร่างกาย โดยเฉพาะผู้ที่ควบคุมตา ปาก คอ และแขนขา โรคนี้สามารถเกิดขึ้นได้กับทุกคนในทุกช่วงอายุ แต่มักพบในหญิงสาว (อายุ 20 และ 30 ปี) และผู้ชายอายุ 50 ปีขึ้นไป อวัยวะใดได้รับผลกระทบจาก myasthenia gravis ในผู้ที่มี myasthenia gravis ร่างกายผลิตแอนติบอดีที่ขัดขวางเซลล์กล้ามเนื้อไม่ให้รับข้อความ (สารสื่อประสาท) จากเซลล์ประสาท ในบางกรณี myasthenia gravis เชื่อมโยงกับเนื้องอกของ the thymus (อวัยวะของระบบภูมิคุ้มกัน) Myasthe

ทำไมถึงมีอัศวินดำอยู่ในหลุมศพที่ไม่มีใครดูแล?
อ่านเพิ่มเติม
คำถามยอดนิยม

ทำไมถึงมีอัศวินดำอยู่ในหลุมศพที่ไม่มีใครดูแล?

"หลุมศพที่ไม่ได้ตั้งใจจริงๆ แล้วเป็น จุดเริ่มต้นของระดับการตัดที่ไปถึง Soul of Cinder ผ่านจุดไฟที่พังยับเยินและผนังด้านล่าง" ผู้ทดสอบอธิบาย พวกเขากล่าวว่านี่คือ "เต็มไปด้วยอัศวินดำเพื่อสักการะ [Dark Souls] ดั้งเดิม"