ข้อมูลการวัดความหนาแน่นที่สร้างขึ้นสำหรับ Western blots คือ มักใช้เพื่อเปรียบเทียบความอุดมสมบูรณ์ของโปรตีนระหว่างกลุ่มตัวอย่าง … ข้อมูลการวัดความหนาแน่นแบบไม่เชิงเส้นถูกสังเกตเมื่อตรวจพบจุดตะวันตกโดยใช้การเรืองแสงอินฟราเรดหรือเคมีลูมิเนสเซนซ์ และภายใต้เงื่อนไข SDS-PAGE ที่แตกต่างกัน
การวิเคราะห์ความหนาแน่นคืออะไร
การวัดความหนาแน่นคือ การวัดความหนาแน่นเชิงปริมาณของแสงในวัสดุที่ไวต่อแสง เช่น กระดาษถ่ายภาพหรือฟิล์มถ่ายภาพเนื่องจากการสัมผัสกับแสง
คุณใช้การวัดความหนาแน่นใน Image J อย่างไร
วัดความหนาแน่นโดยใช้ ImageJ
- คลิกตรงกลางสี่เหลี่ยมแล้วลากข้ามไปยังเลนถัดไป …
- สำหรับเลนสุดท้าย ทำซ้ำขั้นตอน แต่กด Ctrl และ 3 เพื่อตั้งเลนสุดท้าย …
- ใช้เครื่องมือเส้นเพื่อวาดเส้นเพื่อขจัดพื้นหลังเลนออกจากการคำนวณ …
- ไปที่: Analyse→Gels→Label Peaks เพื่อรับรายงาน
คุณวิเคราะห์ผล Western blot อย่างไร
ตรวจสอบเครื่องมือเชิงปริมาณของคุณ .ตัวอย่างเช่น เรียกใช้ blot โดยที่เลนจะบรรจุโปรตีนทั้งหมด 20 µg, 15 µg และ 10 µg หลังจากการวิเคราะห์แล้ว การหาปริมาณสัมพัทธ์ของแถบเป้าหมายควรเป็น 2, 1.5 และ 1 ลองใช้เครื่องมือและการตั้งค่าเชิงปริมาณที่แตกต่างกันจนกว่าคุณจะสร้างผลลัพธ์ที่ถูกต้องได้อย่างน่าเชื่อถือ
คุณจะหาจำนวนบล็อกตะวันตกได้อย่างไร
ขั้นตอนที่ 1: กำหนดพื้นหลังหักความหนาแน่นของโปรตีนที่คุณสนใจ (PI) และการควบคุมการทำให้เป็นมาตรฐาน (NC) ขั้นตอนที่ 2: ระบุ NC ที่มีค่าความหนาแน่นสูงสุด ขั้นตอนที่ 3: แบ่งค่า NC ทั้งหมดด้วยค่าความหนาแน่น NC สูงสุดเพื่อรับค่า NC สัมพัทธ์
